Promoting effect of botulinum neurotoxin serotype A heavy chain on neuritogenesis in cultured Neuro-2a cells

AIM: To observe the neuritogenic actions of botulinum neurotoxin serotype A heavy chain (BoNT/A HC) on cultured Neuro-2a cells and to investigate the related signaling mechanisms for the effect of BoNT/A HC. METHODS: Neuro-2a cells were treated with different doses of BoNT/A HC (0.01, 0.1, 1 and 10 nmol/L), and then the cells were harvested at 24 h, 48 h and 72 h of BoNT/A HC exposure for detecting the neurite length and the percen-tage of the cells with neuronal processes by immunofluorescence staining. The most efficient dose of BoNT/A HC was chosen for exposure to Neuro-2a cells as the above. Whole cell protein was harvested at different time points for detecting the protein levels of phosphorylated ERK1/2 (p-ERK1/2) and phosphorylated Akt (p-Akt) by Western blot. RESULTS: Low doses of BoNT/A HC stimulated the neurite outgrowth, and increased the percentage of the cells with neurites compared with the negative controls (P<0.05), especially in the group with 1 nmol/L of BoNT/A HC treatment. Meanwhile, the phosphorylation of ERK1/2 and Akt was increased after treated with BoNT/A HC. There was an increasing tendency for the phosphorylation of ERK1/2 after the exposure of the cells to BoNT/A HC. The obvious increase in p-ERK1/2 was seen from 60 min to 5 h with 1 nmol/L of BoNT/A HC treatment (P< 0.05), and the increased protein level of p-Akt was mainly observed at 15 min and 60 min (P<0.05). CONCLUSION: BoNT/A HC stimulates the neuritogenesis. The neuritogenic mechanism of BoNT/A HC on Neuro-2a cells might be realized by activation of the phosphorylation of ERK1/2 and Akt.     

辣椒新品种驻椒21的选育

驻椒21是以辣椒雄性不育两用系AB0582为母本,以自交系B0318为父本选育而成的辣椒一代杂种。早熟,全生育182d(天)果实羊角形,果长19.2cm,果宽3.7cm,平均单果质量44.6g,青熟果黄绿色,每667m2产量3380kg左右,辣椒素含量26.2mg·kg-1,VC含量1040mg·kg-1。适宜早春保护地和春露地地膜覆盖栽培。     

岷县黑裘皮羊肾组织成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究

采集岷县黑裘皮羊肾组织,用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法进行继代培养和细胞纯化,并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进行了分析。结果显示:原代和传代细胞生长形态均好,群体倍增时间为28.3 h;染色体2 n=54,二倍体占主体(84%)乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征,未见LDH4、LDH5谱带,与其它羊有明显区别;外源性荧光蛋白转染质粒在该细胞中能进行复制和表达;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。表明该研究已成功建立岷县黑裘皮羊肾组织成纤维细胞系,为在细胞水平上保存岷县黑裘皮羊种质资源以及进行相关研究提供了理想的生物材料。     

稳定表达乙型脑炎病毒NS1蛋白细胞系的建立

为建立稳定表达乙型脑炎病毒(JEV) NS1蛋白的真核细胞系,本研究将编码JEV NS1蛋白的人工合成基因克隆到真核表达载体pCAGG-TK-neo中,构建了重组质粒pCAGG-opti-NS1.重组质粒经脂质体转染RK-13细胞,以含G418的选择性培养基选择培养,经细胞克隆纯化,以间接免疫荧光试验(IEA)筛选表达目的基因的细胞.结果表明,转染的RK-13细胞经G418加压及IFA筛选后,获得表达JEV NS1蛋白的阳性RK-13细胞系.经RT-PCR、western blot和IFA鉴定,该细胞系在传代至第15代后仍然可以稳定表达NS1蛋白.本实验获得了能够稳定表达JEV NS1蛋白的细胞系,为进一步开展JEV相关的研究奠定了基础.     

巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫早熟株对8种抗球虫药的敏感试验

为检测巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫早熟株对常用抗球虫药的敏感性,选用地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和拉沙洛西等8种抗球虫药进行鸡体试验,通过抗球虫活性百分比（percent of optimum anticoccidial aetivity,POAA）、病变记分减少率（reduction of lesion scores,RLS）、相对卵囊产量（relative oocyst production,ROP）和抗球虫指数（anticoccidial index,ACI）4项指标进行综合评价。结果表明,巨型艾美耳球虫早熟株对8种药物敏感;柔嫩艾美耳球虫早熟株对盐霉素轻度敏感,对地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星和拉沙洛西敏感。本研究结果可为对球虫早熟株疫苗的开发与应用提供实验依据。     

辣椒黄绿苗不育系叶片光合色素变化及酶活性研究

研究了辣椒(Capsicum annuum L.)黄绿苗胞质雄性不育系(YBM-A6)、保持系(YBM-B6)及绿苗(96-140)的叶绿素变化及叶片酶活性。从幼苗期到成株期三者的叶绿素含量呈逐步增加的变化趋势,绿苗叶片叶绿素、类胡萝卜含量都远高于黄绿苗,但黄绿苗叶片叶绿素a/b、类胡萝卜素/叶绿素(a+b)(除结果期外)的比值都远大于绿苗。黄绿苗叶片中游离脯氨酸含量均高于绿苗,但其含量变化趋势相同;黄绿苗叶片中过氧化物酶、过氧化氢酶活性变化趋势与绿苗相同;YBM-A6叶片过氧化氢酶活性均低于其保持系YBM-B6,过氧化物酶活性则高于其保持系,超氧化物歧化酶活性在开花结果盛期明显高于保持系YBM-B6和96-140。说明叶绿素和类胡萝卜素含量和变化与辣椒黄绿苗的叶色变化有关,酶活性变化可能与黄绿苗胞质雄性不育系YBM-A6的不育有关。     

三系辣椒新品种沈研18号的选育

沈研18号是以辣椒细胞质雄性不育系A074—3为母本,恢复系0952—7为父本配制的一代杂交种。果实长灯笼形,果纵径15．0cm果横径9．7cm,果色绿,果面略皱,微辣,单果质量195．0g,可食率85％以上。Vc含量61．7mg／kg（鲜质量）,可容性总糖4．08％。适于辽宁、河北、山东、吉林、黑龙江、内蒙古、新疆、...     

人肝癌细胞系HepG2的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型的建立

本试验旨在建立次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺陷型的HepG2细胞系,为细胞杂交与单克隆抗体的研究提供亲本细胞。通过N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导HepG2细胞突变,逐步提高培养液中6-巯基鸟嘌呤(6-TG)的浓度,筛选出对6-TG有抗性的细胞株,检测它在HAT中生长的情况。得到可在含20 μg/mL 6-TG的高糖DMEM完全培养基中稳定生长的细胞株,此细胞株在HAT培养基中第3天出现明显的死亡,第12天全部死亡,诱变后细胞的染色体分布于32-88,染色体众数为48。突变筛选出的细胞具有对6-TG抗性和对HAT敏感的特性,证实该细胞是HGPRT缺陷型细胞株,为以后进行杂交瘤制备提供了适宜的亲本细胞。     

云南气候条件下选育水稻光温敏不育系的策略探讨

 云南光温敏雄性不育水稻的研究和利用虽已经历了较长的时期,但在不育系的选育和制种上一直未取得较大的突破。在新世纪到来之际,为促进云南“两系”杂交稻的育种工作的快速发展,本文结合云南气候的光温特点及云南水稻光温敏不育系选育和利用的经验,对今后云南水稻光温敏不育系的选育、利用的策略进行了探讨。云南纬度低,海拔差异大,日可照时数变化较小,在云南进行温敏不育系的选育和利用具有十分有利的气候条件。其主要的技术路线是利用海拔差异筛选温敏不育系和在不同海拔进行繁殖制种;在选育中运用花药培养技术,缩短温敏不育系的选育周期。     

水稻早恢402体培后代及测交F1主要性状的变异分析

对早熟恢复系早恢402体培后代及其测交F1的变异研究表明，体培R2代性状变异与R1代测交F1性状变异及各性状超亲优势变异的趋势均不同。R1代测交F1与其亲本测交F1在播始天数、有效穗及单株粒重3个性状上的超亲优势差异达极显著水平。R1代F1播始天数的超亲优势变异方向多倾早熟变异，而有效穗及单株粒重的超亲优势变异方向多倾大值变异。